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第17章 牛结核病流行病学(1)

牛结核病传染源

一般认为牛是牛分枝杆菌的真正宿主,但其他几种家养和非家养的动物也有发病报道。已从水牛、非洲水牛、绵羊、山羊、马、骆驼、猪、鹿、羚羊、狗、猫、狐狸、貂、獾、雪貂、鼠、灵长类、美洲驼、非洲大羚、南非羚、貘、驼鹿、象、泽羚、非洲直角大羚羊、旋角羚、犀牛、鼢、地松鼠、獭、海豹、野兔、野鼠,几种肉食性猫科动物,包括狮子、老虎、豹以及大山猫中分离到病原。

结核病畜是主要传染源,结核杆菌在机体中分布于各个器官的病灶内,因病畜能由粪便、乳汁、尿及气管分泌物排出病菌,污染周围环境而散布传染。

主要经呼吸道和消化道传染。如饮用未经消毒的牛奶或污染了结核菌的其他食物可引起消化道传播,也可经胎盘传播或交配感染。吸入被污染的飞沫或媒介是传播牛结核病的最主要方式。动物园的动物和野生动物间常以此方式传播牛结核病,如英国的欧洲獾和新西兰的刷尾袋鼯。由于牛结核分枝杆菌具有长时间在体外存活的能力,因此食入了被结核分枝杆菌污染的食物即可造成种间疾病的传播。

结核病易感动物

牛对牛型菌易感,其中奶牛最易感,水牛易感性也很高,黄牛和牦牛次之;猪、鹿、猴也可感染;马、绵羊、山羊少见;人也能感染,且与牛互相传染。家禽对禽型菌易感,猪、绵羊少见;人对人型菌易感,牛、猪、狗、猴也可感染。

实验动物中豚鼠对结核杆菌、牛分枝杆菌都有高度敏感性,感染结核杆菌、牛分枝杆菌后的病变与人类的进行性结核病变和牛分枝杆菌病变极其相似,是结核杆菌和牛分枝杆菌分离、鉴别、诊断和各种抗结核药物的筛选及病理研究最佳动物。同时,小鼠也是结核杆菌复合群易感的实验动物,大量应用于研究工作。

牛结核病流行特征

一、环境因素

外周环境不良,例如牛舍阴暗潮湿、光线不足、通风不良、饲喂密度大、病牛和健康牛不分群、饲料配比不当、饲料中缺乏维生素和矿物质等,均可导致本病发生。

二、社会发展对牛结核病的影响

牛结核病虽然是一个很古老的疫病,但社会的发展赋予了它新的流行特点。随着牛奶在人们的饮食比例中的加大,人结核病的发病率也在上升,二者呈明显的流行病学相关性。特别是人口流动和耐药菌株的传播使得牛结核病日趋严重。因此,开展广泛深入的流行病学研究,可以为有效防治疫病提供可靠依据。

三、自然及生态因素对牛结核病流行的影响

通过对照研究若干因子与牛结核病流行之间的关系。这些因子包括:群体大小、牛的交易、牛的历史、相邻牛群状况、牛群与野生动物的距离及动物本生因素,如年龄、体况、饲养管理及品种等。结果表明,在群体水平上与结核流行关系较为密切的因子是牛群的大小、牛群的流动以及6个月内相邻牛群结核病流行情况。

四、野生动物造成牛结核病的不断流行

由于野生动物狐狸和獾结核病的出现,增加了牛结核病感染的又一感染因素。野生动物通过排泄物将结核杆菌排出体外,污染了饲草、饲料和饮水等,家畜采食后感染结核杆菌而造成结核病的发生。因此,控制牛结核病,必须兼顾野生动物结核病防治。

此外,检疫不合格,未能及时消除传染源;检疫不合格,盲目引种;对检出的阳性牛不能及时处理,未能从根本上消灭传染源以及人畜间互相感染等是造成牛结核病不断发生和流行的主要原因。

牛结核病的发生与分布

牛结核病在世界范围内均有发生,是世界性疾病。牛结核病严重影响了动物的健康,并对牧场造成惨重的经济损失,世界范围内有5000万头牛感染了结核,造成了经济损失每年达30多亿美元。

据世界卫生组织统计资料,有41.5%的发展中国家结核病疫情在上升。全世界86%的结核病例都发生在发展中国家,最多的是亚洲和非洲国家,少数在拉丁美洲和加勒比海地区。这与发展中国家对牛结核病未采取根除计划存在直接的关系,使得结核病新增病例、发病率、呈报率上升、广泛传播与蔓延。

在发达国家,由于采取了动物结核病控制和根除计划,曾使牛结核分枝杆菌引起的牛和人结核病的发病率大大降低,但是,由于人结核病和野生动物结核病的存在,加之对牛和其他动物群中结核病疫情监控的松懈,使得近年来牛群中结核病的发病率大幅上升。

一、美洲流行情况

美国是世界上第一个实行根除牛结核病的国家。1917年实行联邦和州合作,实施消灭牛结核病的计划,1922年牛结核病发病率下降至4%,1940年下降至0.48%,以后一直呈零星散发的趋势,1967年部分州宣布无结核病牛。目前,美国对外声称无结核病牛群。但是由于野生动物和关上动物结核病及人类结核病的存在,随时有感染牛的可能性,所以,美国的牛群仍处在不断的检疫和高度警惕之中。2003年,广东检验检疫总局从美国进境的142头良种奶牛中,检出了19例患有结核病、副结核病的阳性牛,并进行了扑杀和销毁处理,此举打破了美国在过去的25年没有牛结核病的说法。这表明在长达近百年的奶牛结核病根除计划的美国,奶牛结核病仍然没有完全根除。而近年来报道的密西根州白尾鹿感染牛分枝杆菌的出现,对美国控制和根除牛肺结核的计划造成了严重的威胁。

墨西哥和巴西等国家牛结核病感染率均很高,1995年和1996年,墨西哥肉牛结核病感染率分别为0.02%和0.05%,奶牛结核病感染率分别为2%和8.3%;在对巴西从1985年到1995年10年的检测统计结果表明:1985年牛结核病感染率为5%,1995年增至21%,这表明奶牛结核病的感染和蔓延呈上升趋势。

在34个拉丁美洲和加勒比海国家中,12个国家报道了牛结核病零星散发或呈低发病率,7个国家报道牛结核病呈地方性流行,只有多米尼加共和国报道牛结核病存在高发病率,12个国家没有报道牛结核病,2个国家没有牛结核病的数据。

1995和1996年墨西哥从屠宰场70万头牛的采样分析中得出奶牛结核的感染率分别为2%和8.3%。据巴西1985~1995年10年检测结果统计,结核的阳性率由5%提高到21%。

二、欧洲流行情况

欧共体国家于20世纪50年代签署了控制牛结核病的贸易协定,一直到20世纪末,控制牛结核病的发展依然不平衡。北欧的丹麦、比利时、挪威、德国和荷兰等国已基本上消灭了牛结核病。在英国,牛结核病发病率不断上升,而獾被认为是牛结核重要的传染源,这已经引起英国政府的高度重视。

英国人非常喜爱野生动物獾,而大约有4%獾感染牛结核病,对獾的“检疫—扑杀”策略很难实施,这在很大程度上制约着牛结核病的根除计划的实施。据McGinness报道,1995年英格兰西南地区有316个新的奶牛场被证实患有结核病,比1994年增加15%。1996年,英国奶牛场结核病的发病率已经超过0.5%,而且还在不断上升。在英国,仅在2003年,就有10万例牛结核发生,仅政府补贴和检测费用就达8800万英镑。目前对动物结核的控制方法是“检验和扑杀”,即对于分枝杆菌抗原皮肤反应阳性的动物被视为感染动物而扑杀。

目前对结核病的控制采取检和灭的策略。用分枝杆菌作抗原对动物进行皮肤实验,检出阳性立即扑杀。獾被认为是本病在大不列颠和爱尔兰的重要传染源,目前正在进行大量试验来评价獾在牛结核病防治中的作用。牛分枝杆菌的感染已通过大量的试验如水牛、狮子和羚羊的感染进行了描述。西班牙的牛结核病感染率为10%,意大利存在着牛与熊相互传染牛结核杆菌的现象,这表明野生动物与牛之间是可以互相传播结核病的。

三、大洋洲流行情况

澳大利亚、新西兰等国家已经消灭了牛结核病,但近年来,由于野生动物狐狸、獾等动物结核病的出现,导致牛又感染了结核病。研究结果证明,獾的粪便和组织均可以传播结核病。据新西兰Massey大学Corner等人调查研究发现,在新西兰北岛和南岛的404个接受调查的牛场中,有335个牛场感染了牛结核病,占调查数的83%。在澳大利亚,据调查,有3.1%的奶牛或肉牛感染了牛分枝杆菌,有0.4%的奶牛或肉牛场暴发过结核病。

四、非洲流行情况

1998年在非洲的55个国家中,有25个国家零星报道了牛结核病的发生事件;6个国家报道了牛结核病的存在,只有马拉维和马里2个国家报道牛结核病存在高发病率,4个国家没报道,其余18个国家没有疾病方面的数据。只有极少数国家将牛结核病作为应呈报的疾病和采用“检疫—扑杀”控制策略,但仍有15%的牛群感染结核病;有48个国家没有采用防控措施或措施不得力。非洲大约有35%的牛和82%的人口生活在控制牛结核病不利的地区。2007年,据世界卫组织估计南非人结核病例46万,世界上排第五位。据报道,南非Kruger国家公园的猴、猎豹、狮和水牛等均暴发结核病,公园南部的水牛感染率达42%,中部地区的感染率为21%。在Kruger 国家公园中有多种动物也感染了牛分枝杆菌,如水牛、狮子、羚羊,说明了该地区感染的宿主多样性。

五、亚洲流行情况

亚洲是人类结核病的高发区。据WHO报道,目前人结核病发病率和感染率位居世界第一的印度,结核病已经成为严重威胁人类健康的重大障碍。有5%~10%的人结核病是由牛结核分枝杆菌引起的,因此,控制牛结核病已成为消除人结核病传染源的有效措施之一。

奶牛结核病在亚洲各国均有不同程度的存在和发生,在亚洲的36个国家中,16个国家零星报道了牛结核病的发生事件。在亚洲国家中,只有7个国家采取了检疫和部分扑杀的控制措施,并进行申报,其余29个国家只采取了部分控制政策或根本没有采取控制措施。在亚洲国家中,因牛结核病感染,只有6%的牛和低于1%的水牛采取了申报检疫和扑杀政策,94%牛和99%的水牛采取了部分控制和没有采取任何控制措施。因此,绝大多数的亚洲人生活在采取部分控制措施或根本没有采取任何控制措施的环境中。2002年,韩国在亚洲首次报道了雄性麋鹿因感染牛结核杆菌而死亡的病例。

牛结核病分子病原学分型方法

牛结核分枝杆菌基因多态性分析,牛结核病是由牛型和人型结核分枝杆菌引起的。过去人们普遍认为牛结核病主要由牛型结核杆菌引起。但近年来的研究表明,奶牛结核病原经分子生物学分型主要为人型结核分枝杆菌。牛型菌既能感染人和猪,也能使其他动物致病。人结核和牛结核之间可以相互感染,禽结核杆菌也可以感染人和牛。牛分枝杆菌主要感染不同种属的温血动物。除了哺乳动物外,一些禽类也对牛结核很敏感,包括类鹦鹉鸟、石鸽、北美洲乌鸦。人对牛结核也很敏感,且很多病例与感染动物有接触史。

在全球范围内,家养牛被认为是牛结核分枝杆菌的主要宿主。但是,近年来发现有几种野生动物是贮存宿主,包括新西兰的刷尾袋鼯、联合王国的欧洲灌、密歇根的白尾鹿、水牛和南非的几种羚羊,其他如大象和犀牛也是牛结核分枝杆菌的宿主。因此,牛结核病的流行严重危害公共卫生安全,所以做好牛结核病的诊断和对牛结核病流行病学调查,对公共卫生有重要意义。

一、常用的结核杆菌分子流行病学分型方法

1.结核分枝杆菌复合群标准分型方法

Van Embden推荐IS6110-RFLP分型为结核分枝杆菌复合群标准分型方法。IS6110最初由Thierry等人报道,属插入序列IS3家族,因其在基因组中插入位置和拷贝数不同可对菌株进行鉴别[108-110]。通常结核分枝杆菌复合群IS6110拷贝数在0~25个之间,M.bovis有1~3个拷贝,BCG含单一拷贝(命名为IS987),而非结核分枝杆菌无IS6110拷贝。IS6110长度约为1.35kb,其上有PvuⅡ、BamHⅠ等酶切位点,两端为28bp的反转重复顺序。DR区和ipl区是IS6110插入的热点区域。IS6110-RFLP分型技术是从培养基上获得的结核菌经DNA提取后,Pvu II限制性内切酶消化,酶切片段在琼脂糖凝胶上电泳分离。转移并固定到膜上后进行杂交分析,然后进行显色或显影。DNA指纹结果采用Gelcompare软件或Taxotron软件进行分析,计算相似系数进行簇型分析。

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