临床意义：①HBeAb阳转后大多病毒复制停止，病变活动静息；②HBeAb不是一个保护性抗体，HBeAb阳性患者有时也可检出HBV-DNA，表明仍有病毒复制，并具有传染性；③与甲胎蛋白阳性相关，应警惕原发性肝癌的存在；④不少病例HBeAb阳性，始终未出现过HBeAg，是因HBV基因存在变异，无法分泌HBeAg，虽然血清无HBeAg，但病毒仍在复制，可出现疾病加剧现象；⑤在血清转换期，HBeAg和HBeAb有可能同时存在，但滴度均低。
3．HBV核心抗原和抗体
（1）HBcAg
HBcAg是HBV的核心成分，通常包裹在病毒中，仅个别感染者HBcAg表位可暴露在病毒颗粒的表面。肝细胞大量坏死的重症患者，细胞内的HBcAg才释放入血流。HBcAg易与HBcAb结合形成免疫复合物，故难以从血清中检出。随着检测技术提高已可用ELISA法或RIA法检出。
临床意义：①HBcAg存在于Dane颗粒的核心和患者的肝细胞内，是乙型肝炎病毒复制的直接指标；②HBcAg可作为疾病传染性和乙肝活动性病变的指标，血清和肝内的HBcAg水平呈正相关，可互补并协助早期诊断；③急性乙肝早期HBcAg阳性和ALT升高呈正相关，提示含有HBcAg的肝细胞可能是细胞免疫功能主要攻击的靶细胞；④HBcAg阳性与HBcAg、HBV-DNA、DNA多聚酶阳性相关，是传染性指标；⑤可作为抗病毒及免疫治疗的有效指标，因此对疾病的发展及传染性的判断均有重要意义；⑥HBcAg的检测有助于HBsAg暂时阴转，或在乙型肝炎发病早期由于HBsAg含量太低而呈阴性时的诊断。
（2）HBcAb
HBcAb不是保护性抗体，而是反映HBV感染的重要指标。测定HBcAb（或IgG型HBcAb）能检出HBsAg、HBsAb系统不能发现的HBV感染。HBcAg较HBsAg有更强的免疫原性，几乎所有HBV感染都可产生HBcAb，而且较HBsAb产生早得多，可在血清中长期存在（几年至几十年），当其他指标全部阴转后，HBcAb仍可阳性。高滴度的HBcAb表示现行感染，常与HBsAg并存。低滴度的HBcAb表示既往感染，常与HBsAb并存。
单项HBcAb阳性，可能为：①急性感染后的恢复早期（窗口期）：许多人在HBV急性感染消退时，HBsAg减少甚至消失，HBsAb尚未出现，称为“窗口期”，HBcAb是惟一能检出的特异性HBV指标；②HBcAb被动转移：HBsAg携带者母亲所生的婴儿可因母体抗体被动转移（HBcAb可通过胎盘）而呈现HBcAb单独阳性，此种母传HBcAb可持续1年以上，成人也可能由于抗体的被动转移而成为HBcAb单独阳性者；③既往感染伴HBsAb消失；④既往感染伴低水平HBsAg。无症状者的单项HBcAb有30％或更高的假阳性，约有20％结果不能重复。HBcAb检测可提高HBV感染者检出率，有助于诊断及流行病学调查。
（3）IgM型HBcAb
IgM型HBcAb是HBV感染早期出现的抗体，90％出现在发病第1周，个别迟至1个月之后。
临床意义：①高滴度的IgM型HBcAb是HBsAg阴性患者病原诊断的主要依据，可提高急性乙型肝炎的诊断率，并对病毒性肝炎的分型提供依据；②HBcAg持续存在，诱导IgM型HBcAb不断产生，慢性HBV感染者亦可检出低水平的IgM型HBcAb，影响其对急性肝炎的诊断价值；③其产生与机体免疫反应有关；④可能是类风湿因子造成的假阳性；⑤暴发性肝炎患者可检出较急性肝炎更高滴度的IgM型HBcAb，可能与肝细胞破坏、再生及分化不良有关。观察其在整个病程中的动态变化，并参考其他生化及免疫指标，方可做出正确评价。
（4）IgA型HBcAb
此型抗体文献报道不多。笔者发现慢性活动型肝炎血清IgA型HBcAb阳性率高于慢性迁延型肝炎和急性肝炎；肝内HBcAg阳性者高于阴性者。这可能是因为HBV在肝内复制，HBcAg经肝脏系统“排泄”入消化道内，刺激肠道系统产生免疫应答，生成特异性IgA抗体，吸收入血后，使IgA型HBcAb增高，其滴度与肝组织病变有明显的相关性，可反映肝脏损害程度和范围。
4．HBV前S蛋白
HBV的衣壳蛋白由一组HBsAg的糖蛋白组成，包括S、前S1（preS1）、前S2（preS2）蛋白，为HBV-DNA的S和前S基因的编码产物。PreS1由108个或119个氨基酸组成，其21～47肽段是HBV与肝细胞的结合位点，可能与HBV侵入肝细胞有关。PreS2由55个氨基酸组成，其在HBV附着和侵入肝细胞的机制中起着重要作用。抗-PreS1和抗-PreS2分别为PreS1和PreS2的抗体。
（1）PreS1抗原和PreS1抗体
1）PreS1抗原阳性与HBV-DNA和HBeAg阳性有很好的相关性，可作为HBV存在和复制的一种新标志。一般认为PreS1出现在HBV感染最早期，在急性乙型肝炎的潜伏期即可从血清中检出低滴度的PreS1抗原，然后滴度迅速上升，至恢复期后PreS1转阴。在急性期PreS1很快转阴提示病毒清除和病情好转，反之若PreS1抗原持续阳性则提示疾病的慢性化。PreS1阳性可作为判断慢性乙型肝炎患者病情活动性和传染性的一项指标，动态测定PreS1的变化，对评估慢性乙型肝炎的治疗效果及预后具有重要意义。
2）抗-PreS1阳性与血清ALT水平相关，抗-PreS1抗体能反映HBV的清除和肝细胞的损伤。抗-PreS1（包括IgM和IgG）在HBV感染早期就能被检出，比HBsAb出现得早；被认为是一种保护性抗体，可以作为病毒清除，患者康复的一种标志。随着更深入的研究，抗-PreS1检测在乙肝诊断中的临床意义会更加明确。
（2）PreS2抗原和PreS2抗体
1）PreS2可作为HBV复制的指标之一。在急性乙型肝炎早期，PreS2可与HBeAg、HBV-DNA一同被检出；恢复期PreS2先阴转，随后HBeAg消失，是预后良好的指征。HBsAg阳性者中，HBsAg滴度，PreS2、HBsAg比值和HBV-DNA水平与PreS2平行，这三项指标HBeAg阳性组均明显高于HBeAg阴性组。慢性乙型肝炎患者在急性发作时，常在ALT升高前PreS2就明显升高，提示常规检测PreS2对预测慢性肝炎急性发作可能有临床价值。我们利用发光酶免疫法测定PreS2，除可预测慢性乙肝急性发作外，还在甲肝流行时检出了其中的甲、乙肝混合感染者。PreS2测定可作为判断HBV复制的一项指标，同时血清PreS2检测可对HBV复制做出定量的推断，动态观察有助于急、慢性乙型肝炎预后的判断。
2）抗-PreS2在急性乙型肝炎康复早期出现，先于HBsAb，并发挥其保护性抗体的作用，也是观察肝炎病情进展、预后，乙型肝炎疫苗免疫效果的又一可靠的观察指标。过去认为抗-PreS2在体内只是短暂存在，迅速被HBsAb所代替而外周血中不易测到；现认为抗-PreS2也可比较长期存在。短期存在的往往是IgM型，IgG型抗-PreS2可作为中和抗体在外周血中长期存在，甚至可与IgM型抗-PreS2同时存在，在急性或慢性肝炎中均有类似情况。
5．血清聚合白蛋白受体
多聚人血清白蛋白受体（polymerizedhumanserumalbuminreceptor，PHSAR）系PreS2蛋白N端120～145氨基酸的亲水区。PHSAR在PreS2部位，与PreS2活性一致，两者在常规检测中表现了生化本质的同一性，并与HBeAg有较密切的关系。因此其意义及消长规律基本与PreS2相一致。已证实，感染HBV患者的血清可与PHSA起反应，而HBeAg阳性的HBsAg血清内，HBV颗粒具有一种对PHSA的受体。PHSAR只对人和黑猩猩的血清白蛋白起反应，而牛、马、兔等的白蛋白则无反应，具有种属特异性。
现认为PHSAR对HBV感染起着链桥及介导作用。测定多聚白蛋白受体可代替检测HBeAg，辅助判断传染性与病情变化。反映肝细胞受损和HBV在体内的复制情况。
6．HBV-DNA多聚酶及HBV-DNA
（1）DNA多聚酶（DNAP）测定
DNAP存在于HBV核心内，参与HBV-DNA的短链延长，修补HBV-DNA的单股区，使成为完整的双链分子，从而参与病毒的复制。乙肝潜伏期末，血清出现HBsAg后于临床发病及ALT升高之前，便可检出DNAP。血中DNAP阳性反映HBV活动性复制，有传染性。它与HBeAg及Dane颗粒相关。目前由于影响检测效果的因素很多，故临床上较少应用。
（2）Dane颗粒抗体检测
1978年Albert曾报道在急性乙型肝炎病毒感染后可出现抗-Dane颗粒的特异性抗体，此抗体的出现与血循环中Dane颗粒的消失有关。
闻玉梅建立了抗-Dane检测并应用于临床。通过临床观察，抗-Dane与HBsAb、HBeAb及HBcAb无关系。随访患者中，抗-Dane阳性者恢复较好，不发展成慢性肝炎。但抗-Dane出现是否有清除HBV的作用，有待进一步研究。
（3）HBV-DNA定性测定
虽然乙型肝炎HBeAg和DNAP可以作为一个反映传染性及估计预后的指标，但有部分乙型肝炎患者测不到DNAP活性，用敏感的方法也测不到HBeAg，而可用斑点杂交或者PCR检测血清中极微量的HBV-DNA。HBV-DNA斑点杂交可测Pg级水平的DNA，较RIA法敏感度约高出1000倍，PCR法可检出1％的HBV-DNA。
急性感染时，血清HBV-DNA出现在潜伏末期至ALT峰值前，较HBsAg早而短暂；慢性感染时，HBV-DNA在血清中的存在大体与HBeAg一致。血清HBV-DNA是病毒复制的直接标志，表示血液的传染性和宿主的感染状态，是临床疗效观察，预后判断的一项重要指标。
HBV-DNA的PCR检测特别适于下列情况：①HBsAg（+）／HBeAb（+）时，输血或母婴传播的鉴定；②HBsAg（+）／HBeAb（+），未检出HCV或HDV混合感染的慢性肝炎，大部分HBV-DNA（+）；③干扰素治疗后，判定疗效及是否有复发；④HBsAg（-）肝病，有或无其他HBV标志物，检出其中HBV感染者；⑤肝移植中，评估和随访移植肝的HBV再感染情况。
HBV-DNA的PCR检测结果与乙肝“两对半”检测结果的综合评价：
1）与HBsAgELISA检测结果不一致：①HBsAg阴性而HBV-DNA的PCR阳性，可能为HBsAg含量低或是HBV感染初期；②HBsAg阳性而HBV-DNA的PCR阴性，可能为PCR试剂灵敏度差，或者是血中HBsAg是由HBV-DNA整合到人染色体与宿主基因共同表达所致。
2）与HBsAb的关系：HBsAb阳性，血清HBV-DNA的PCR一般为阴性，少部分亦可阳性。
3）与HBeAg、HBeAb和HBcAb的关系：HBeAg阳性血清，HBV-DNA的PCR几乎全为阳性，HBeAg阴性而HBeAb和HBcAb阳性者，血清HBV-DNA的PCR阳性率依产物检测方法不同而异，电泳法仅为30％，而核酸探针杂交方法可达80％。
PCR较斑点杂交更加敏感，要求操作人员具有一定的分子生物学实验基础，良好的实验室条件，操作需认真细致。目前，杂交似更适合判断病毒血症与某些临床疾病的关系。PCR仅能检出复制的病毒，难以表达非复制状态的感染，并不能代替血清标志物的检测。一般认为PCR检测HBV-DNA并不适合于大规模的普查或常规使用，多用于临床发病机制的研究或药物筛选等。在临床高度怀疑为乙型肝炎，但其他乙型肝炎指标为阴性时，也可作为一项辅助诊断指标。
（4）HBV-DNA定量测定
定量检测病毒核酸有多种方法，主要有分子杂交和PCR法。前者包括：①分支链DNA信号扩增技术（bDNA）；②放射性核素标记液相分子杂交；③DNA-RNA双抗体夹心杂交；④膜印迹杂交。PCR有：①PCR-ELISA法；②荧光-PCR法；③竞争性PCR法。目前比较成熟的方法有：①bDNA法；②PCR-ELISA法；③荧光PCR法。
1）bDNA定量检测病毒核酸：该方法采用ELISA操作模式，通过非同位素标记探针与病毒核酸杂交后的信号扩增（而非靶基因的扩增），经化学发光仪检测光信号，对照设定含量的克隆标准品的发光量，由计算机算出原始标本中的核酸含量，以MEq／mL（106拷贝／mL）表示，其中M为10，Eq／mL相当于一分子病毒基因所产生的发光当量。HBV-DNA检测范围0.7～5700MEq／mL。化学发光较之荧光、酶促显色的敏感度又提高了数十至数百倍，这正是bDNA能不经核酸扩增就可获得较高敏感度的原理所在。
bDNA技术与同类分子杂交技术相比，敏感度高，特异性好，阳性检出率高。与PCR相比，第二代的bDNA技术对各基因型HCV的敏感性达到93％，特异性98％，重复性和稳定性好。每份标本双管检测，以酶促反应获得的信号不存在半寿期问题。易操作，污染少。类似于ELISA的实验模式，任何一个普通实验室，任何一个有一定实验技术的人员都能顺利操作，没有PCR的后期污染之虞。缺点是：检测的阈值较高（7×105拷贝／mL），低水平的病毒感染不能被检出，在临床诊断上的意义较小，对bDNA检测阴性的患者，应配合采用PCR复测以排除低水平感染。
2）PCR-ELISA检测HBV核酸该方法为全自动或半自动分子杂交法，敏感性高，特异性强，结果判定客观。采用数学化结果，有利于质控管理，污染少。
